實驗(yan)醫學微(wei)生物學常用的器材一般(ban)包(bao)括玻璃器材、金屬器械、橡(xiang)膠制品及塑料制品等(deng)，每(mei)類(lei)器材的處理及消毒措施都有不同。嚴格的消毒滅菌工作極為重要，直(zhi)接影響(xiang)著整個實驗(yan)能否順(shun)利(li)進行(xing)。1、消毒(du)滅菌方法

1.干熱(re)滅菌法

是(shi)利用恒溫(wen)干(gan)燥箱內120℃～150℃的(de)(de)高熱，并(bing)保持90～120分鐘，殺死細(xi)菌(jun)和芽(ya)孢，達到滅(mie)(mie)菌(jun)目(mu)的(de)(de)的(de)(de)一種方(fang)法。主要適用于(yu)不便在(zai)壓(ya)力蒸(zheng)汽(qi)(qi)滅(mie)(mie)菌(jun)器(qi)(qi)(qi)中進行滅(mie)(mie)菌(jun)，且不易被高溫(wen)損(sun)壞的(de)(de)玻(bo)璃器(qi)(qi)(qi)皿(min)、金屬器(qi)(qi)(qi)械以及(ji)不能(neng)和蒸(zheng)汽(qi)(qi)接觸的(de)(de)物(wu)品(pin)(pin)的(de)(de)滅(mie)(mie)菌(jun)。用此方(fang)法滅(mie)(mie)菌(jun)的(de)(de)物(wu)品(pin)(pin)干(gan)燥，易于(yu)貯存。酒(jiu)精(jing)燈(deng)火焰燒灼滅(mie)(mie)菌(jun)法也是(shi)屬于(yu)干(gan)熱滅(mie)(mie)菌(jun)的(de)(de)方(fang)法之一，在(zai)進行動(dong)物(wu)細(xi)胞體外(wai)培養(yang)工作時，常(chang)須利用工作臺面上的(de)(de)酒(jiu)精(jing)燈(deng)火焰對金屬器(qi)(qi)(qi)具(ju)及(ji)玻(bo)璃器(qi)(qi)(qi)皿(min)口緣進行補充滅(mie)(mie)菌(jun)。

2.濕熱滅菌(jun)法

壓力蒸(zheng)汽(qi)(qi)濕(shi)熱滅菌(jun)法它利用高壓蒸(zheng)汽(qi)(qi)以及在蒸(zheng)汽(qi)(qi)環境中(zhong)存在的(de)(de)(de)潛熱作用和(he)(he)良好的(de)(de)(de)穿透力，使菌(jun)體蛋(dan)白(bai)質凝(ning)固(gu)變(bian)性而(er)使微(wei)生(sheng)物死亡(wang)。適合于(yu)布(bu)類工作衣、各種器皿、金屬器械、膠塞、蒸(zheng)餾水、棉(mian)塞、紙和(he)(he)某些(xie)培養液的(de)(de)(de)滅菌(jun)。高壓蒸(zheng)汽(qi)(qi)滅菌(jun)器的(de)(de)(de)蒸(zheng)汽(qi)(qi)壓力一般調整為(wei)1.0～1.1 kg/cm2，維持(chi)20～30min即可達到(dao)滅菌(jun)效果。

3.射(she)線(xian)滅菌法

利用紫(zi)外線(xian)燈進行(xing)照射(she)滅菌(jun)(jun)的(de)(de)方(fang)法。紫(zi)外線(xian)是一(yi)種低能量的(de)(de)電磁輻射(she)，可以殺滅多種微生物。紫(zi)外線(xian)的(de)(de)作用機制是通過對微生物的(de)(de)核酸(suan)及(ji)蛋白質等的(de)(de)破壞作用而(er)使其滅活。適合于實驗(yan)室空氣、地面、操作臺面滅菌(jun)(jun)。滅菌(jun)(jun)時間為30min。用紫(zi)外線(xian)殺菌(jun)(jun)時應注(zhu)意，不能邊照射(she)邊進行(xing)實驗(yan)操作，因為紫(zi)外線(xian)不僅對人體皮膚有傷害，而(er)且對培養物及(ji)一(yi)些試(shi)劑等也(ye)會產(chan)生不良影(ying)響。

4.過(guo)濾除(chu)菌法

是將液(ye)體(ti)或氣(qi)體(ti)通(tong)過(guo)有微(wei)(wei)孔(kong)的(de)濾(lv)膜(mo)(mo)過(guo)濾(lv)，使大于濾(lv)膜(mo)(mo)孔(kong)徑的(de)細(xi)菌(jun)(jun)等微(wei)(wei)生物顆粒阻留(liu)，從而達到(dao)除菌(jun)(jun)的(de)方法。過(guo)濾(lv)除菌(jun)(jun)法大多用于遇熱易發生分解、變性(xing)而失效的(de)試劑、酶液(ye)、血清、培養液(ye)等。

目前(qian)，常用微孔濾(lv)膜金屬濾(lv)器或塑料濾(lv)器正壓過濾(lv)除菌(jun)，或用玻璃細菌(jun)濾(lv)器、濾(lv)球負壓過濾(lv)除菌(jun)。濾(lv)膜孔徑應在0.22～0.45μm范圍內或用更(geng)小(xiao)的細菌(jun)濾(lv)膜，溶(rong)液通(tong)過濾(lv)膜后，細菌(jun)和孢子(zi)等因大于濾(lv)膜孔徑而被阻(zu)，并利用濾(lv)膜的吸附作用，阻(zu)制小(xiao)于濾(lv)膜孔徑的細菌(jun)透過。

5.化學消毒(du)劑消毒(du)法

用于那些(xie)(xie)不能(neng)利用物(wu)理(li)方法(fa)進行滅(mie)菌的(de)(de)物(wu)品、空氣、工作(zuo)面、操作(zuo)者皮膚、某些(xie)(xie)實驗(yan)器皿等(deng)。常用的(de)(de)化學消毒(du)劑包括甲醛、高錳酸(suan)鉀、70%～75%乙(yi)醇、過氧(yang)乙(yi)酸(suan)、來(lai)蘇爾水、0.1%新潔(jie)爾滅(mie)、環氧(yang)乙(yi)烷、碘伏或碘酊等(deng)。其中利用70%～75%乙(yi)醇、10%次氯(lv)酸(suan)鈉、等(deng)進行(xing)實(shi)驗材料(liao)的(de)滅(mie)菌;利用(yong)甲(jia)醛加(jia)高錳酸(suan)鉀(jia)[(2mL甲(jia)醛+1g高錳酸(suan)鉀(jia))/m3]或乙二(er)醇(6mL/m3)等加(jia)熱熏蒸(zheng)法進行(xing)無菌室和(he)培養(yang)室的(de)消毒(du)。在(zai)使(shi)用(yong)時(shi)應注意安全(quan)，特別是(shi)用(yong)在(zai)皮膚或實(shi)驗材料(liao)上的(de)消毒(du)劑，須選用(yong)合(he)適的(de)藥劑種類、濃度和(he)處理時(shi)間，才能達到(dao)安全(quan)和(he)滅(mie)菌的(de)目的(de)。

6.抗生素抑菌法

主要(yao)用于培養液，是培養過程中預防(fang)微(wei)生物(wu)污染的重要(yao)手段以及(ji)作為微(wei)生物(wu)污染不嚴(yan)重時的“急救”措(cuo)施。常用的抗生素(su)有(you)青霉(mei)素(su)、鏈霉(mei)素(su)和(he)新(xin)霉(mei)素(su)等。 

2. 不(bu)同 種類 物品及(ji)培養物的消毒滅(mie)菌方法(fa)

1.無菌(jun)操作室滅菌(jun)

      培(pei)養材(cai)料進(jin)行(xing)培(pei)養、觀察或(huo)更換(huan)培(pei)養液(ye)時，必(bi)須從各方(fang)面防止任何污(wu)染物進(jin)入(ru)培(pei)養液(ye)或(huo)容器(qi)，所(suo)以無(wu)菌(jun)(jun)(jun)操(cao)(cao)(cao)作室的滅菌(jun)(jun)(jun)是(shi)至關重要(yao)的。由于(yu)無(wu)菌(jun)(jun)(jun)操(cao)(cao)(cao)作室的污(wu)染來源(yuan)主要(yao)是(shi)空氣中(zhong)的細菌(jun)(jun)(jun)和真菌(jun)(jun)(jun)孢子，因(yin)此長(chang)期停用后的無(wu)菌(jun)(jun)(jun)操(cao)(cao)(cao)作室應(ying)(ying)進(jin)行(xing)熏蒸(zheng)(zheng)滅菌(jun)(jun)(jun)，熏蒸(zheng)(zheng)是(shi)用高(gao)錳酸鉀+甲醛[(2mL甲醛+1g高(gao)錳酸鉀)/m3]進(jin)行(xing)無(wu)菌(jun)(jun)(jun)室的滅菌(jun)(jun)(jun)。經(jing)常使(shi)用的無(wu)菌(jun)(jun)(jun)操(cao)(cao)(cao)作室，在每次(ci)使(shi)用前都應(ying)(ying)進(jin)行(xing)地面衛生(sheng)清潔(jie)，并(bing)用紫(zi)外(wai)線(xian)燈照射30min，進(jin)行(xing)空氣滅菌(jun)(jun)(jun)。對超凈工作臺，每次(ci)操(cao)(cao)(cao)作前用紫(zi)外(wai)燈照射30min，然后用70%～75%酒(jiu)精(jing)擦拭(shi)。

2.培養液滅菌

       培養液在制備過程中帶有各種雜菌，分裝后應立即滅菌，或在24小時內完成滅菌工序。目前常用過濾除菌法除去培養物操作液和培養液中的細菌。或對培養液中耐熱組進行高壓蒸汽滅菌，然后在無菌室加入經過過濾除菌的不耐熱溶液，混勻后分裝備用。

使(shi)用高(gao)壓(ya)蒸(zheng)汽(qi)(qi)滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)器(qi)(qi)(qi)滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)時(shi)(shi)(shi)(shi)，將分裝好的(de)(de)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)液(ye)(ye)(ye)放(fang)入底部(bu)有(you)一(yi)定(ding)量(淹沒加熱(re)管)涼水的(de)(de)高(gao)壓(ya)蒸(zheng)汽(qi)(qi)滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)器(qi)(qi)(qi)內(nei)，增壓(ya)至0.35~0.4 kg/cm2時(shi)(shi)(shi)(shi)排凈滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)器(qi)(qi)(qi)內(nei)冷(leng)空氣(qi)，以(yi)便使(shi)蒸(zheng)汽(qi)(qi)能(neng)到(dao)(dao)達(da)各個消(xiao)(xiao)毒部(bu)位，保(bao)證消(xiao)(xiao)毒滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)*。然(ran)后(hou)繼(ji)續加壓(ya)加熱(re)，當壓(ya)力(li)表(biao)讀數達(da)到(dao)(dao)1.0~1.1 kg/cm2為121℃，保(bao)持(chi)15~20min即可。由于(yu)(yu)消(xiao)(xiao)毒滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)效果(guo)取(qu)(qu)決于(yu)(yu)溫度(du)(du)而不(bu)(bu)是(shi)壓(ya)力(li)，所以(yi)在(zai)(zai)一(yi)定(ding)壓(ya)力(li)下(xia)(xia)保(bao)持(chi)較長(chang)的(de)(de)消(xiao)(xiao)毒滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)時(shi)(shi)(shi)(shi)間(jian)是(shi)必須的(de)(de)。在(zai)(zai)121℃的(de)(de)蒸(zheng)汽(qi)(qi)溫度(du)(du)下(xia)(xia)可以(yi)很快殺死各種(zhong)細菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)及高(gao)度(du)(du)耐熱(re)的(de)(de)芽孢桿(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)，因此許多培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)液(ye)(ye)(ye)的(de)(de)消(xiao)(xiao)毒滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)壓(ya)力(li)、溫度(du)(du)一(yi)般保(bao)持(chi)在(zai)(zai)1.0～1.1 kg/cm2、121℃。消(xiao)(xiao)毒滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)時(shi)(shi)(shi)(shi)間(jian)與需要消(xiao)(xiao)毒滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)的(de)(de)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)液(ye)(ye)(ye)量密切(qie)相關(guan)(表(biao)2-3)，時(shi)(shi)(shi)(shi)間(jian)不(bu)(bu)足達(da)不(bu)(bu)到(dao)(dao)滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)效果(guo)，時(shi)(shi)(shi)(shi)間(jian)過(guo)(guo)長(chang)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)液(ye)(ye)(ye)內(nei)的(de)(de)一(yi)些化學物質遭到(dao)(dao)破壞(huai)，影響(xiang)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)液(ye)(ye)(ye)成(cheng)分。消(xiao)(xiao)毒滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)結束后(hou)，關(guan)閉熱(re)源，只有(you)當滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)器(qi)(qi)(qi)內(nei)壓(ya)力(li)降為零時(shi)(shi)(shi)(shi)才能(neng)打開(kai)放(fang)氣(qi)閥，排除(chu)剩(sheng)余蒸(zheng)汽(qi)(qi)，取(qu)(qu)出(chu)(chu)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)液(ye)(ye)(ye)。不(bu)(bu)可在(zai)(zai)壓(ya)力(li)較高(gao)時(shi)(shi)(shi)(shi)打開(kai)放(fang)氣(qi)閥，引起(qi)減壓(ya)沸騰，使(shi)容器(qi)(qi)(qi)中液(ye)(ye)(ye)體(ti)溢出(chu)(chu)。培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)液(ye)(ye)(ye)組成(cheng)中如含有(you)遇熱(re)易分解的(de)(de)物質，則需用過(guo)(guo)濾方法消(xiao)(xiao)毒滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)。首先對培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)液(ye)(ye)(ye)中耐熱(re)組分進行(xing)高(gao)壓(ya)蒸(zheng)汽(qi)(qi)滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)后(hou)放(fang)置在(zai)(zai)無(wu)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)場所，固體(ti)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)液(ye)(ye)(ye)在(zai)(zai)40℃左右瓊(qiong)脂即將凝結前，加入經過(guo)(guo)過(guo)(guo)濾除(chu)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)的(de)(de)不(bu)(bu)耐熱(re)溶液(ye)(ye)(ye)，混勻后(hou)冷(leng)卻備(bei)用。

使用(yong)高(gao)(gao)壓(ya)蒸汽(qi)(qi)滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)器(qi)滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)時(shi)(shi)，將分(fen)裝好的(de)(de)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)液(ye)(ye)(ye)放(fang)入底部(bu)有一(yi)定量(淹沒加(jia)熱管)涼水的(de)(de)高(gao)(gao)壓(ya)蒸汽(qi)(qi)滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)器(qi)內(nei)，增(zeng)壓(ya)至0.35~0.4 kg/cm2時(shi)(shi)排凈滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)器(qi)內(nei)冷空氣，以(yi)(yi)便(bian)使蒸汽(qi)(qi)能到達(da)各(ge)個消(xiao)毒(du)(du)部(bu)位(wei)，保證消(xiao)毒(du)(du)滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)*。然后(hou)繼續加(jia)壓(ya)加(jia)熱，當(dang)壓(ya)力(li)(li)表讀(du)數(shu)達(da)到1.0~1.1 kg/cm2為121℃，保持15~20min即(ji)可(ke)。由于(yu)消(xiao)毒(du)(du)滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)效果(guo)(guo)取(qu)決于(yu)溫度而不是壓(ya)力(li)(li)，所(suo)以(yi)(yi)在(zai)一(yi)定壓(ya)力(li)(li)下(xia)保持較長的(de)(de)消(xiao)毒(du)(du)滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)時(shi)(shi)間(jian)(jian)是必須的(de)(de)。在(zai)121℃的(de)(de)蒸汽(qi)(qi)溫度下(xia)可(ke)以(yi)(yi)很快殺死各(ge)種細(xi)(xi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)及高(gao)(gao)度耐(nai)熱的(de)(de)芽孢桿菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)，因此許(xu)多培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)液(ye)(ye)(ye)的(de)(de)消(xiao)毒(du)(du)滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)壓(ya)力(li)(li)、溫度一(yi)般保持在(zai)1.0~1.1 kg/cm2、121℃。消(xiao)毒(du)(du)滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)時(shi)(shi)間(jian)(jian)與需(xu)要消(xiao)毒(du)(du)滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)的(de)(de)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)液(ye)(ye)(ye)量密(mi)切相關(表2-3)，時(shi)(shi)間(jian)(jian)不足(zu)達(da)不到滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)效果(guo)(guo)，時(shi)(shi)間(jian)(jian)過(guo)長培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)液(ye)(ye)(ye)內(nei)的(de)(de)一(yi)些化學物質(zhi)遭(zao)到破壞(huai)，影(ying)響培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)液(ye)(ye)(ye)成(cheng)分(fen)。消(xiao)毒(du)(du)滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)結(jie)束后(hou)，關閉熱源，只(zhi)有當(dang)滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)器(qi)內(nei)壓(ya)力(li)(li)降(jiang)為零時(shi)(shi)才能打(da)開放(fang)氣閥(fa)，排除剩余蒸汽(qi)(qi)，取(qu)出培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)液(ye)(ye)(ye)。不可(ke)在(zai)壓(ya)力(li)(li)較高(gao)(gao)時(shi)(shi)打(da)開放(fang)氣閥(fa)，引(yin)起減壓(ya)沸(fei)騰，使容器(qi)中液(ye)(ye)(ye)體(ti)溢出。培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)液(ye)(ye)(ye)組(zu)成(cheng)中如含(han)有遇熱易分(fen)解(jie)的(de)(de)物質(zhi)，則需(xu)用(yong)過(guo)濾(lv)方法(fa)消(xiao)毒(du)(du)滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)。首先(xian)對培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)液(ye)(ye)(ye)中耐(nai)熱組(zu)分(fen)進行高(gao)(gao)壓(ya)蒸汽(qi)(qi)滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)后(hou)放(fang)置在(zai)無菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)場所(suo)，固體(ti)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)液(ye)(ye)(ye)在(zai)40℃左右瓊(qiong)脂即(ji)將凝結(jie)前(qian)，加(jia)入經過(guo)過(guo)濾(lv)除菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)的(de)(de)不耐(nai)熱溶液(ye)(ye)(ye)，混(hun)勻后(hou)冷卻(que)備用(yong)。液(ye)(ye)(ye)體(ti)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)液(ye)(ye)(ye)在(zai)冷卻(que)到室溫后(hou)再加(jia)入過(guo)濾(lv)除菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)溶液(ye)(ye)(ye)。過(guo)濾(lv)除菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)時(shi)(shi)，使用(yong)孔徑(jing)為0.22～0.45μm或(huo)更小的(de)(de)細(xi)(xi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)濾(lv)膜。過(guo)濾(lv)除菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)可(ke)利(li)用(yong)抽濾(lv)裝置或(huo)注(zhu)射過(guo)濾(lv)器(qi)進行，所(suo)用(yong)器(qi)皿均應進行高(gao)(gao)壓(ya)消(xiao)毒(du)(du)滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)，溫度不應超過(guo)121℃。

3.玻璃器皿、塑料(liao)器皿和器械(xie)滅菌

玻(bo)璃(li)器(qi)皿可進行干熱滅(mie)菌或高壓蒸汽滅(mie)菌，但在蒸汽滅(mie)菌后及時(shi)烘干(gan)水分(fen)。對(dui)不(bu)能進行(xing)高壓(ya)蒸汽滅菌的塑料器(qi)皿可(ke)用(yong)(yong)(yong)75%酒(jiu)精浸泡，使(shi)用(yong)(yong)(yong)前在(zai)(zai)無菌操(cao)作臺(tai)面上(shang)晾干(gan)的同時(shi)，用(yong)(yong)(yong)紫(zi)外線重復(fu)殺菌。實驗室還(huan)可(ke)以用(yong)(yong)(yong)環氧乙烷(wan)滅菌袋(dai)對(dui)塑料器(qi)皿進行(xing)消毒，消毒后的器(qi)皿要充分(fen)散氣(qi)2～4小(xiao)時(shi)后才可(ke)使(shi)用(yong)(yong)(yong)。無菌操(cao)作所用(yong)(yong)(yong)的各種器(qi)械(xie)，一般采(cai)用(yong)(yong)(yong)干(gan)熱或(huo)高壓(ya)蒸汽滅菌，或(huo)用(yong)(yong)(yong)75%酒(jiu)精浸泡，然(ran)后在(zai)(zai)無菌操(cao)作臺(tai)面上(shang)晾干(gan)的同時(shi)再用(yong)(yong)(yong)紫(zi)外線重復(fu)殺菌;在(zai)(zai)使(shi)用(yong)(yong)(yong)期間可(ke)多次對(dui)其進行(xing)酒(jiu)精燈火焰灼燒(shao)滅菌。

4.培養材(cai)料的消毒滅菌

采(cai)自動物(wu)機體的(de)(de)實(shi)驗材(cai)料(liao)，攜帶著微生(sheng)物(wu)及雜質，接種前須進行(xing)表(biao)面(mian)(mian)消毒滅菌，對內部已受微生(sheng)物(wu)侵(qin)染的(de)(de)材(cai)料(liao)應予以(yi)淘(tao)汰。從(cong)動物(wu)機體采(cai)集的(de)(de)某些組(zu)織塊，須用(yong)消毒劑進行(xing)浸泡(pao)(pao)處理，進行(xing)表(biao)面(mian)(mian)消毒。常用(yong)消毒劑有(you)過氧化氫(10~12%，浸泡(pao)(pao)5~15 min)、過氧乙酸(0.05%，浸泡(pao)(pao)30s~1min)、酒(jiu)精(70~75%，浸泡(pao)(pao)2 min)。

3. 滅菌 程序 驗(yan)證 內容

撰寫驗證方(fang)案(an)及制定評估標準。

確認滅菌設備(bei)技術(shu)資料齊全、安(an)裝正確，并能處于正常(chang)運行。

確(que)認關鍵(jian)設(she)備控(kong)制(zhi)儀表在規定的參(can)數范圍(wei)內(nei)能(neng)正(zheng)常運(yun)行(xing)。

采用(yong)被滅(mie)(mie)菌物品或(huo)模擬(ni)物品進行(xing)重復實驗確認滅(mie)(mie)菌效(xiao)果符合規(gui)定。

完善(shan)文件記錄(lu)，撰(zhuan)寫驗(yan)證(zheng)報告。

4. 滅菌 程序 運行(xing) 監控 

關鍵(jian)參數應在驗(yan)證(zheng)確定的范圍內：溫度、壓力、時(shi)間、濕度、滅(mie)菌(jun)氣體濃度、輻照劑量等(deng)

滅菌程(cheng)序定期(qi)驗(yan)證，時(shi)效(xiao)不超過(guo)半(ban)年。

滅菌(jun)設備或程(cheng)序發生(sheng)變更重新進行驗(yan)證。

 5.滅菌(jun)保證

滅菌冷卻階(jie)段(duan)防(fang)止已滅菌物品再次污染。

適用生物指示劑(ji)、化學指示劑(ji)等監控(kong)滅菌(jun)結(jie)果

生物指示劑

基(ji)本要求：

菌種的耐受性應大于需滅菌產(chan)品(pin)中所有可能污(wu)染(ran)菌的耐受性。

菌種應無致病性。

菌株(zhu)應(ying)穩定，存活期長，易(yi)于保存。

易于培養。若(ruo)使用休(xiu)眠孢子(zi)，孢子(zi)含(han)量在(zai)90%以(yi)上。

 常用生物(wu)指示劑

濕熱滅菌：嗜熱脂肪芽孢(bao)桿菌孢(bao)子（ATCC7953等，活孢(bao)子數為5×105～5×106個/片(pian))

干熱滅菌(jun)：枯草芽(ya)孢桿菌(jun)孢子(zi)（ATCC9372等，活孢子(zi)數(shu)為5×105～5×106個/片(pian))

輻射(she)滅菌：短小芽孢(bao)桿(gan)菌孢(bao)子（ATCC27142等，活(huo)孢(bao)子數為(wei)5×107～5×108個/片)

氣體滅菌：

環氧(yang)乙烷滅菌：

枯草芽孢桿菌孢子(zi)（ATCC9372等，活孢子(zi)數為5×105～5×106個/片)

氣態過氧化(hua)氫滅(mie)菌：嗜熱(re)脂肪(fang)芽(ya)孢桿菌孢子（ATCC7953等，活孢子數(shu)為(wei)1×106～5×106個/片)

過濾(lv)除菌法：缺陷假單胞菌（ATCC19146等(deng)）