一、微(wei)生物實(shi)驗(yan)室注意事項

1、工作室要矮(ai)小平整、光滑(hua)、無凹凸不平或棱角(jiao)、四壁及屋頂用不透水之材質，便(bian)于擦洗(xi)及殺菌。

2、室內采(cai)光面積應大，從室外(wai)應能看到室內的(de)情況。

3、為保證無(wu)菌室的潔凈，無(wu)菌室周圍(wei)需設(she)緩沖走(zou)廊，走(zou)廊旁再(zai)設(she)緩沖間，其面積可小于無(wu)菌室。

4、無菌室(shi)、緩沖走廊及緩沖間(jian)均設有(you)日光(guang)燈(deng)及紫(zi)外(wai)燈(deng)，殺菌紫(zi)外(wai)燈(deng)離工(gong)作臺以一米為宜，其電源開關(guan)應設在(zai)室(shi)外(wai)。

5、無菌(jun)室與緩沖間進出(chu)口應設(she)推拉門(men)，門(men)與窗(chuang)平(ping)齊，門(men)縫要封緊(jin)，兩門(men)要錯開，以(yi)免空氣對流造成污染。

二、使用(yong)無菌室(shi)注意事項

1、無菌(jun)室(shi)要保持清潔(jie)整齊，室(shi)內(nei)僅存放必(bi)要的檢驗用品，如(ru)：酒精燈、酒精棉、火(huo)柴、鑷子、接種針、接種環、記號鉛等。

2、室(shi)內檢(jian)驗(yan)用具及桌(zhuo)凳應保持(chi)固定位置(zhi)，不(bu)隨便移動。

3、每2周用2%消毒液（二氧(yang)化氯等）水(shui)溶液擦拭工作(zuo)臺(tai)、門、窗、桌凳及地面，然(ran)后(hou)用二氧(yang)化氯溶液噴霧消毒空氣或過氧(yang)乙酸熏蒸，紫(zi)外燈殺菌。

4、定期檢查室內空氣無菌狀(zhuang)態(tai)，進行細菌和霉菌的檢查。

5、無菌(jun)室殺(sha)菌(jun)前應將所(suo)有物品(pin)置于操作之部(bu)位，然后打開紫(zi)外燈殺(sha)菌(jun)半小時，時間(jian)一到，關閉紫(zi)外燈待用(yong)。

6、操作(zuo)應嚴格按照(zhao)無菌操作(zuo)規定進(jin)行，操作(zuo)少說話，不(bu)喧嘩，以保持環(huan)境的無菌狀態。

三、配(pei)制培養基注意(yi)事項(xiang)

1、滅(mie)菌時嚴格按(an)照規定加熱、加壓(ya)(ya)，切忌時間過長壓(ya)(ya)力過高，否則會造成(cheng)營養(yang)成(cheng)分的(de)破壞。

2、切忌(ji)使用(yong)銅鍋(guo)、鐵鍋(guo)配制培養基。

3、培養基不能二次(ci)高壓滅菌。

4、劃線(xian)用培(pei)養基可放入冰箱(xiang)(xiang)或培(pei)養箱(xiang)(xiang)除去水(shui)分。 

四、無菌操作注(zhu)意(yi)事項

1、進入(ru)無菌室之(zhi)前先進行(xing)空氣消毒，工作(zuo)人員(yuan)進入(ru)無菌室以前，必須于緩沖間(jian)更換(huan)消毒過的工作(zuo)服、工作(zuo)帽及工作(zuo)鞋(xie)。

2、動(dong)作要輕，盡(jin)量減(jian)少走(zou)動(dong)，以免攪動(dong)空氣(qi)。

3、操作要(yao)靠近酒精燈火焰區(qu)，使(shi)用吸(xi)管(guan)要(yao)用吸(xi)球。

4、接種環/接種針用(yong)(yong)前用(yong)(yong)后(hou)進行火(huo)焰滅菌(jun)。

5、工作(zuo)結束作(zuo)好終末消(xiao)毒，所有(you)培(pei)養(yang)物(wu)均應高壓滅菌后再扔掉，以(yi)免污染環境。

五(wu)、菌落總數測定注意事項

1、選取(qu)樣品要(yao)有代(dai)表性，如為固體樣品要(yao)多(duo)采幾個部位，液體檢樣要(yao)混勻。

2、每(mei)次做(zuo)樣從(cong)開始到結(jie)束都(dou)要進行(xing)超凈臺空氣(qi)凈度的(de)監(jian)測，同時對(dui)所有滅菌(jun)物品(pin)做(zuo)空白對(dui)照。

3、為減(jian)少稀釋倍數的誤差，在(zai)做連續(xu)遞增稀釋時，每一(yi)稀釋液應充(chong)分振搖使其均勻，同時每一(yi)稀釋度換一(yi)支吸(xi)管。

4、在進行(xing)連續稀釋(shi)時，應將吸管內液(ye)體沿壁流(liu)入，勿使吸管觸及(ji)稀釋(shi)液(ye)。

5、傾倒營養(yang)瓊脂培養(yang)基(ji)平板時，溫(wen)度要在46±1℃之間，數量要在15ml左右為宜，不要太多太少。

6、培養物48h培養后培養基失重不(bu)超過15%，培養箱內要放水。

7、檢樣加入(ru)平皿后應立即(ji)傾(qing)注(zhu)培(pei)養基(ji)并旋(xuan)轉混勻(yun)，一般從(cong)稀釋到傾(qing)注(zhu)不超過20分(fen)鐘。

8、平皿內如有鏈狀(zhuang)菌(jun)落(luo)生長時：菌(jun)落(luo)之間無明顯界限且僅有一條鏈可視(shi)為(wei)一個菌(jun)落(luo)，如為(wei)不同來(lai)源的(de)幾條鏈則將每條鏈各(ge)做一個菌(jun)落(luo)記(ji)。

9、做菌落(luo)記數(shu)時平板里所有(you)的(de)菌落(luo)都要記數(shu)。

六(liu)、大腸菌群注意(yi)事項

1、對乳糖膽(dan)鹽管產(chan)氣(qi)的(de)觀察只要有氣(qi)泡往(wang)上冒(mao)就算產(chan)氣(qi)。

2、在(zai)伊紅美蘭瓊脂(zhi)平板(ban)上挑取(qu)菌落(luo)時(shi)一定要選典型(xing)菌落(luo)。

七、霉菌、酵母菌檢驗注意事項(xiang)

1、稀釋樣品時用無菌(jun)水。

2、3天觀察時把所有的酵母菌做標記。

3、如果有霉菌(jun)被培養(yang)出(chu)，請(qing)不要把皿蓋(gai)隨便(bian)打開，待培養(yang)物高壓滅菌(jun)后(hou)再(zai)清洗。

八、壞包(bao)分(fen)析注意(yi)事項

1、對(dui)已(yi)(yi)開(kai)包的酸包脹包要馬上轉(zhuan)移到無菌瓶中，已(yi)(yi)防二次污(wu)染。

2、根據壞包(bao)的不同表現(xian)狀態適當的選擇(ze)培養項目。

3、做微(wei)生物培養的同(tong)時測定感官(guan)、理(li)化指標，注意其(qi)有何變化。

九(jiu)、商業無菌注意事項

1、要求有厭氧培養(yang)的一定要在厭氧環(huan)境下培養(yang)。

2、取樣(yang)測pH值，要與同批正常樣(yang)相比，看是(shi)否(fou)有顯著差(cha)異。

3、對(dui)pH 值(zhi)有(you)可(ke)疑的樣品都(dou)要做涂片染色鏡檢，與同批(pi)正常(chang)樣相比，看是否有(you)明顯的微生物增殖(zhi)現象。

4、保溫期間出現的(de)脹(zhang)包(bao)，漏包(bao)、或開包(bao)發(fa)現PH、感官異常、變質，進(jin)一步鏡(jing)檢發(fa)現有異常數量(liang)細菌的(de)樣品(pin)均應進(jin)行劃線培養。